Spectrophotometer dengan a dapat menghasilkan beberapa panjang gelombang sumber cahaya, melalui rangkaian alat spektroskopi, menghasilkan panjang gelombang sumber cahaya tertentu, cahaya melalui sampel ujian, sebahagian cahaya diserap, hitung nilai serapan sampel, yang diubah menjadi kepekatan sampel. Sampel nilai serapan berkadar dengan kepekatan sampel.
Sinaran cahaya monokromatik melalui bahan di bawah larutan ujian, jumlah yang diserap oleh bahan dan kepekatan bahan dan ketebalan lapisan cecair sebanding dengan panjang jalur optik, hubungannya adalah seperti berikut:
A=- lg (I / I).=- lgT=kLc
Jenis: A, untuk penyerapan.
I. Untuk intensiti cahaya kejadian;
Saya untuk penghantaran intensiti cahaya;
T untuk penghantaran bahan;
K sebagai pekali penyerapan molar;
L sedang menganalisis jalur optik fizikal, iaitu panjang sisi piring kolorimetrik;
C ialah kepekatan bahan;
Panjang gelombang cahaya penyerapan selektif bahan, dan pekali penyerapan yang sesuai adalah pemalar bahan. Apabila bahan tulen yang diketahui dalam keadaan tertentu tersedia setelah pekali penyerapan sampel ujian dalam keadaan yang sama dengan larutan, ukur penyerapannya, dapat dikira dari jenis sampel ujian dalam kandungan bahan tersebut. Penyerapan cahaya di kawasan cahaya yang dapat dilihat, selain bahan tertentu, banyak bahan itu sendiri tidak menyerap tetapi dapat bergabung dengan reagen kromogenik dalam keadaan tertentu atau setelah diproses membuat pengukuran warnanya lagi, sehingga disebut juga analisis kolorimetri. Oleh kerana faktor-faktor kromogenik yang mempengaruhi kedalaman warna lebih banyak, ketika instrumen ini menggunakan kemurnian cahaya monokromatik yang lemah dan sering, maka penentuan penerapan bahan standard dan bahan rujukan pada masa yang sama.
